技術服務信息
服務名稱：CRISPR-Cas9技術
服務類別：干細胞技術服務 - 干細胞轉基因
價格：歡迎來電詳詢023-65316016，023—65316556
允許參觀：允許參觀
所在區域：重慶.重慶
更新時間：2023/4/28 9:20:00
瀏覽人數：10522
服務商：威斯騰生物
誠信指數：2433點
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使用范圍：僅限科研使用，不能應用于臨床
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技術服務詳細描述
CRISPR-Cas9技術
Cas9作用機理
CRISPR/Cas9系統 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/ CRISPR-associate 9)被稱為第三代基因組編輯技術，是細菌和古細菌在長期演化過程中形成的一種適應性免疫防御，可用來對抗入侵的病毒及外源DNA。由單一蛋白(Cas9)、crRNA和tracrRNA形成的RNA-蛋白復合體能夠對外源性DNA進行識別并生成DNA雙鏈斷裂(double-strand breaks, DSBs)，從而誘發DNA損傷修復機制。該技術能夠利用RNA介導的DNA靶向功能對多種生物基因組的任意區域進行編輯，此系統的工作原理是crRNA（CRISPR-derived RNA）通過堿基配對與tracrRNA（trans-activating RNA）結合形成 tracrRNA/crRNA復合物，此復合物引導核酸酶Cas9蛋白在與crRNA配對的序列靶位點剪切雙鏈DNA。而通過人工設計這兩種RNA，可以改造形成具有引導作用的sgRNA（short guide RNA），足以引導 Cas9 對 DNA 的定點切割。
Cas9優勢
CRISPR/Cas9作為一種新的基因編輯技術，被評為2013年生物學10大突破之一，有著一些無可比擬的優點：首先，CRISPR/Cas9系統的可用位置更多，理論上基因組中每8個堿基就能找到一個可以用CRISPR/Cas9進行編輯的位置，因此可以說這一技術能對任一基因進行操作；其次，CRISPR-Cas9系統更具有可拓展性，可以通過對Cas9蛋白的修飾，讓它不切斷DNA雙鏈，而只是切開單鏈，這樣可以大大降低切開雙鏈后帶來的非同源末端連接造成的染色體變異風險；此外還可以將Cas9蛋白連接其他功能蛋白，來在特定DNA序列上研究這些蛋白對細胞的影響；更為重要的是，CRISPR-Cas9系統的使用極為方便，只需要簡單的幾步就能完成，幾乎任何實驗室都可以開展工作。
Cas9作用領域
由于CRISPR-Cas9系統在真核細胞內特別是人類細胞中也能發揮很好的功能，這顯示出了其巨大的應用潛力。例如在基礎科學研究領域，CRISPR-Cas9系統被用來定點敲除或修飾基因，從而便于研究這些基因的生物學功能；同時CRISPR-Cas9系統的商業化應用潛力也不容小視，例如：在生物治療領域，結合誘導多能干細胞 (Induced pluripotent stem cells, iPSCs)技術，人們可以將通過基因編輯修復的iPS細胞重新分化為正常組織和器官來供病人使用；CRISPR/Cas9技術可用于人類免疫缺陷病毒(HIV)引起的艾滋病、人乳頭瘤病毒(HPV)引起的宮頸癌等病毒性疾病的治療；該技術可用于精準醫療，可對基因組進行精確的編輯，修復受損的基因，敲除致病疾病和病毒；可用于臨床治療HBB基因突變引起的β-地中海貧血；該技術還可用于構建動物疾病模型等。
CRISPR/Cas9系統的出現為基因工程提供了一個強有力的應用新工具，將給基因組定向編輯的研究和應用領域帶來突破性的技術革命，特別是在基因功能解析、人類疾病靶向治療等應用中有巨大的潛力和廣闊的前景。更令人鼓舞的是，CRISPR/Cas9操作簡單、實驗周期短、節約成本，在基因治療、精準醫療和動物模型建立方面的巨大優勢，有著巨大的商業價值和市場空間。
威斯騰生物服務流程
威斯騰生物服務項目
| 分子生物學檢測 | 蛋白質與免疫學 | 動物實驗 |
| 實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
| ELISA（酶聯免疫吸附法）技術 | Western-blot 實驗服務 | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務 | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達純化 | 骨神經損傷模型 |
| 染色質免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達純化 | 心肌缺血模型 |
| GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質組學 | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學 | 肺動脈高血壓動物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
| 過表達/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
| 過表達/干擾腺病毒包裝純化 | 細胞整體實驗外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
| 腺相關病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細胞培養 | 肝纖維化模型 |
| 細胞因子芯片 | 骨髓間充質干細胞培養 | 膽結石模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 脂肪干細胞培養 | 急性胰腺炎模型 |
| 生長因子芯片 | 心肌成纖維細胞培養 | 急性腎衰竭模型 |
| 炎癥因子芯片 | 軟骨細胞培養 | 體內血栓模型 |
| 血管生成因子芯片 | 血管內皮細胞培養 | 關節炎模型 |
| 凋亡因子芯片 | 神經元細胞培養 | I型和II型糖尿病模型 |
| 趨化因子芯片 | 內皮組細胞原代培養 | 裸鼠成瘤 |
| HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 基因編輯動物 | |
| 電生理相關服務 | 動物整體實驗服務 | |
| 膜片鉗實驗 | ||
| 細胞生物學檢測 | 高通量測序 | 代謝組學 |
| 細胞原代培養 | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
| 細胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
| 細胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
| 細胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學相關實驗 |
| Transwell細胞遷移/侵襲 | 16s擴增子測序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small RNA測序 | 小動物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
| 臺盼藍檢測細胞活性 | 單細胞測序 | PET-CT |
| 藥物篩選細胞學實驗 | circleRNA測序 | |
| 細胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
| 細胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細胞生物學整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細胞成管實驗 | ||
| 病理檢測 | CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點突變細胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）檢測 | 報告基因敲入細胞系 | SNP芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 | 科研設計指導&文章評估/潤色 |
| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | 科研文獻論著翻譯 |
| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 | 論文翻譯潤色服務 |
| 特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍等） | 臨床實驗/科研實驗設計方案指導 | |
| 行為學檢測 | 藥物篩選服務項目 | 藥效學評價 |
| 曠場實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學評價 |
| 重復性刻板行為檢測 | 細胞高內涵藥物篩選平臺 | 心血管系統藥物藥效學評價 |
| 動物跑臺檢測 | 蛋白質組學靶標研發平臺 | 泌尿系統藥物藥效學評價 |
| 強迫游泳 | 分子藥理研究平臺 | 內分泌系統藥物藥效學評價 |
| 生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 抗炎免疫藥物藥效學評價 | |
| 常規藥物體外篩選 |
【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務！
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